Первичная оценка системы гемостаза
Перечень выполняемых исследований отличается между ЛПУ в зависимости от профиля и групп обследуемых пациентов. В свою очередь, перечень скрининговых (рутинных) тестов, включающих в себя оценку функции целых звеньев системы гемостаза, в достаточной степени унифицирован. В указанный перечень входят тесты для определения времени кровотечения, количества тромбоцитов, а также исследования плазменного гемостаза, представленные тестами ПВ, АЧТВ и фибриноген. Данный перечень тестов позволяет получить общее представление о состоянии сосудисто-тромбоцитарного и плазменного гемостаза, а также определить необходимость и план дальнейшего диагностического поиска.
Протромбиновое время по Quick – скрининговый тест, разработанный Armand Quick и предназначенный для оценки белково-синтетической функции печени, оценки состояния внешнего и общего путей свертывания, а также для мониторинга антикоагулянтной активности антагонистов витамина К.
Принцип теста заключается в in vitro моделировании повреждения сосудистой стенки и запуска каскада свертывания от ф.VIIа. Для выполнения теста в исследуемый образец бедной тромбоцитами плазмы добавляется тромбопластин (тканевой фактор + фосфолипиды), а также ионы кальция для нейтрализации действия цитрата натрия и поддержки процессов свертывания.
В результате активации процессов коагуляции образуется фибриновый сгусток. Определяется время (секунды) от момента добавления в реакционную смесь реагента ПВ до образования и детекции фибринового сгустка.
Активированное частичное тромбопластиновое время – скрининговый тест, предназначенный для оценки внутреннего пути каскада свертывания, контроля антикоагулянтной терапии нефракционированным гепарином и выявления ингибиторов. «Частичным» тест называется потому, что в составе реакционной смеси отсутствует тромбопластин, моделирующий повреждение сосудистой стенки и активацию свертывания по внешнему пути.
Принято выделять 3 критерия чувствительности реагента АЧТВ:
- Чувствительность к дефициту факторов свертывания
- Чувствительность к присутствию гепарина
- Чувствительность к присутствию волчаночного антикоагулянта
Указанные виды чувствительность существенно отличаются в зависимости от состава реагента. При выборе реагента АЧТВ следует в первую очередь определить цели выполнения данного теста в конкретной лаборатории т.к. в некоторых случаях, избыточная чувствительность реагента, например, к волчаночному антикоагулянту может осложнять обработку результатов исследований.
Принцип теста заключается в добавлении в реакционную смесь активатора контактной фазы (фактора Хагемана, ф.XII) с дальнейшей активацией каскада свертывания по внутреннему пути с участием фосфолипидов (входящих в состав реагента). Ионы кальция, также добавляемые в реакционную смесь, выполняют функцию, аналогичную функции при проведении теста ПВ. В результате активации процессов коагуляции образуется фибриновый сгусток. Определяется время (секунды) от момента добавления в реакционную смесь ионов кальция до образования и детекции фибринового сгустка.
Определение концентрации фибриногена – скрининговый тест, предназначенный для определения концентрации фибриногена и выявления количественных и качественных типов его дефицита. “Золотым стандартом” является определение фибриногена по методу Clauss.
Принцип теста заключается в подготовке разведения плазмы в отношении 1:20 (для снижения интерференции со стороны гепарина и ПДФ) и добавления в реакционную смесь избытка тромбина (обычно 35-100 NIH единиц/мл) и ионов кальция. Под действием избытка тромбина от фибриногена отщепляются фибринопептиды А и B и в ходе последующих реакций образуется фибриновый сгусток, время формирования которого прямо пропорционально концентрации фибриногена в исследуемой плазме. Полученные результаты в секундах преобразуются в единицы концентрации с использованием калибровочной кривой. Общеиспользуемыми единицами для выдачи результата концентрации фибриногена являются г/л, но встречаются лаборатории, использующие мг/дл.