Прием, подготовка и стабильность проб
Критерии отклонения проб для исследования системы гемостаза в соответствии с рекомендациями CLSI H21-A5:
- пробирка с наличием сгустка
- некорректный тип пробирки/наполнителя
- нарушено соотношение кровь/антикоагулянт
- отсутствует/нарушена маркировка пробирки
- нарушены условия хранения/транспортировки цельной крови/плазмы (температура, время)
- выраженный гемолиз
Пробоподготовка образца (центрифугирование)
- Бедная тромбоцитами плазма (PPP, БТП): используется для большинства исследований системы гемостаза. PPP получают путем центрифугирования в течение 15 минут при 2000-2500 g и комнатной температуре.
- Бестромбоцитарная плазма (PFP, свободная от тромбоцитов плазма): используется для некоторых исследований системы гемостаза, в которых необходимо максимально снизить влияние тромбоцитов на процесс исследования (напр. при определении ВА), а также при заморозке плазмы для длительного хранения. PFP получают путем сбора супернатанта из пробирки с PPP в пластиковую пробирку без наполнителей и повторным его центрифугированием при тех же условиях.
- Богатая тромбоцитами плазма (PRP): используется для проведения исследований функциональной активности тромбоцитов. PRP получают путем центрифугирования при 200-250g.
Стабильность образцов плазмы
- Полученные образцы плазмы необходимо хранить при комнатной температуре до проведения исследований. Хранение в холодильнике может привести к получению некорректных результатов исследований.
- Стабильность образцов плазмы зависит от типа назначенного исследования и информации в инструкции к аналитической системе. Например: ПВ - 8 часов, АЧТВ - 4 часа (если необходимо определить активность гепаринов – 2 часа), фибриноген - 4 часа, D-димер - 8 часов.
- При необходимости отложенного выполнения исследования (научная деятельность, режим накопления образцов и др.) образцы бестромбоцитарной плазмы могут быть однократно заморожены при -70 С° (долгосрочное хранение) или -20 С° (краткосрочное, 2-4 недели, хранение). Рекомендуется формировать аликвоты > 500 мкл.
- Разморозка плазмы должна выполняться при 37С° (водяная баня, термостат) для минимизации рисков холодовой активации факторов свертывания VII, XII и получения некорректных результатов исследований, разморозка при комнатной температуре недопустима.